鼻炎临床疗效安全性评价及相关机制的小鼠动物模型实验研究
发布时间：
2022-07-15
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目的
评价穴位埋线治疗变应性鼻炎(Allergic Rhinitis, AR)的临床疗效和安全性，探讨穴位埋线对变应性鼻炎机体鼻戮膜神经源性炎症及免疫相关基因表达谱的调节作用，从临床和基础两方面为为穴位埋线治疗AR的临床运用提供科学依据。
方法
采用随机、盲法、对照的临床研究方法，通过EXCEL软件RAND函数产生随机数字，将符合纳入标准的128名AR受试者分为A组(穴位埋线组)和B组(穴
位假埋线组)。两组均采用相同的取穴方案，每位受试者共接受两次穴位埋线/假埋线治疗，两次治疗间隔2周。以视觉模拟评分量表(visual analogue scale VAS )积分及鼻眼结膜相关生活质量问卷调查量表(Rhinocoujunctivitis Quality of Life Questionaire )积分为主要的疗效评价指标，以鼻内镜检查，以及血清特异性IgE. IL-4. IL-10. II,-12. IFN一及VCAM-1等实验室检测指标作为第二疗效评价指标，治疗期间的合并用药情况、受试者的不良反应也将被记录。在治疗前、治疗结束后4周(血清学指标该时间点未行检测)、治疗后8周不同时间点随访受试者，评价穴位埋线暇埋线的临床疗效及安全性。
以卵清蛋白致敏SD大鼠的方法制作变应性鼻炎动物模型，分为治疗组A和对照组B，另设空白组C。每组各15只SD大鼠。A组迎香穴(LI20)埋线，B组不行任何治疗。A组大鼠行迎香穴穴位埋线治疗。治疗后10天，同时取各组大鼠鼻茹膜组织，行HE染色及感觉神经}lC P物质(substance P,SP)、降钙素基因相关肤calcitoningene related peptide, CGRP)和神经激肤A(neurokinin A, NKA)的免疫组织化学染色。观察以下内容:1)造模及治疗期间大鼠变应性鼻炎相关的行为学评分变化;2)光镜下每张切片以嗜酸性粒细胞浸润情况为主的炎症病变情况;3)感觉神经肤免疫组化染色情况及积分光密度值(iOD)的测定情况。
采用方法2中同样的造模、分组及干预方法，每组SD大鼠各3只。A组大鼠第二次迎香穴埋线后取各组大鼠鼻茹膜，经RNA抽提、纯化、质量检测、cDNA合成后，以第二代功能分类Real-time PCR芯片一The Rat Inflammatory Response&Autoimmunity RTZ ProfilerTM PCR Array(含84个目标基因)研究穴位埋线治疗后鼻茹膜免疫相关基因表达谱的改变情况，并以△OCt方法进行三组间两两比较的数据分析。
结论
1.穴位埋线及假埋线均有助于改善变应性鼻炎患者的症状(VAS评分)及相关的生活质量(RQLQ评分)。但穴位埋线组由于有埋入线体的持续刺激，该组受试者的症状(VAS评分)及相关的生活质量(RQLQ评分)改善较假埋线组更持久。穴位埋线也有助于改善受试者的鼻勤膜颜色、鼻分泌物、下鼻甲的肿胀情况，以及受试者治疗前后血清特异性IgE的表达情况，但对参与免疫反应的其他细胞因子无改善作用。
2.穴位埋线可能通过改善感觉神经肤参与的鼻腔神经源性炎症而减轻变应性鼻炎的状况。但穴位埋线治疗的AR大鼠模型组，经治疗，症状虽较治疗前缓解，但与空白组相比，组间感觉神经肤的表达差异仍有统计学意义，提示虽然没有明显症状，但是翁膜的炎症状态仍在持续。
3.利用功能性分类基因芯片技术有的放矢地对穴位埋线治疗的变应性鼻炎动物的鼻豁膜的免疫相关基因表达谱进行差异表达基因的筛选是可行的。与全基因表达谱芯片的研究相比，该方法能够更为快速、准确地筛选出目标基因，进而为穴位埋线治疗变应性鼻炎的治疗方法提供理论依据，并为进一步的研究指明方向。
关键词
临床疗效评价，临床安全性评价，动物实验，鼻炎动物模型，大鼠动物模型
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