连花清瘟颗粒对甲型 H1N1 流感病毒性肺炎小鼠肺组织的保护效果及作用机制
发布时间：
2022-06-21
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摘要
作为威胁人类健康的传染性疾病之一，流行性感冒（简称流感）不仅发病率高，同时还有高传染率、高病死率的特点，尚不能得到有效控制。
我国是流感高发国家之一，我国流感病死率较高，1997 年暴发的H5N1流感病死率高达66%～80%;2009年新型甲型 H1N1 流感暴发，因其发病急，传播范围广，影响了全球 200 多个国家和地区;目前流感的治疗方式主要为抗病毒治疗，疫苗接种的保护率低，且成本较高。（推荐阅读：LPS诱导的肺损伤模型小鼠、小鼠模型、801-D人大细胞肺癌）
甲型 H1N1流感病毒已经成为引起重症肺炎的病原体之一，而且甲型 H1N1 流感病毒感染导致的重症肺炎往往容易进展为急性呼吸窘迫综合征，因此，开展抗甲型 H1N1流感病毒药物的研究仍具有重要意义。临床常将连花清瘟颗粒用于上呼吸道感染的治疗，在新型冠状病毒肺炎疫情发生后，连花清瘟颗粒也被用来预防及治疗新型冠状病毒肺炎，并且取得了较好的治疗效果，其可以广谱抗病毒，通过调节多种信号通路抑制病毒对细胞的侵袭。
研究发现，在甲型 H1N1 流感病毒入侵机体的早期，机体会应激产生干扰素，干扰素可与细胞膜特异性受体（IFNAR）结合，激活 Ja-nus激酶（JAK）/信号转导及转录激活因子（STAT）信号通路，使肺炎加重，本研究旨在基于JAK/STAT 信号通路，探究连花清瘟颗粒对甲型 H1N1 流感病毒性肺炎小鼠动物模型肺组织的保护效果及作用机制。
目的
基于Janus 激酶（JAK/信号转导及转录激活因子（STAT））信号通路，探讨连花清瘟颗粒对甲型H1N1流感病毒性肺炎小鼠动物模型肺组织的保护效果及机制。
方法
使用不同稀释倍数的甲型 日H1N流，感病毒液感染 BALB/c小鼠，观察小鼠存活率及肺水肿严重程度，从而确定造模病毒稀释倍数。设置模型组（HN组）、连花清瘟颗粒组（LC组）及对照组，各 10只。LC组予连花清瘟颗粒（5 g/kg）溶液灌胃5 d后，滴鼻感染甲型 H1N1流感病毒，然后持续给药干预5 d;H1N1 组滴鼻感染甲型H1N1流感病毒，对照组用与造模病毒液同体积的生理盐水滴鼻;在LC组给药的同时，H1N1 组与对照组均用同体积生理盐水灌胃。
观察各组小鼠健康状态，采用实时荧光定量 PCR 检测小鼠肺组织JAK1、STAT3 mRNA表达水平，观察肺组织病理学变化，采用Western blot检测小鼠肺组织JAK1、STAT3蛋白表达水平，采用 ELISA 检测小鼠血清 IgG 水平。
结果
确定使用稀释倍数为 100的病毒液进行造模。与对照组比较，H1N1组、LC组 JAK1、STAT3 mRNA表达水平明显升高，而相较于H1N1 组，LC组JAK1、STAT3 mRNA表达水平明显降低，差异有统计学意义（P<0.05）。对照组小鼠肺组织正常;H1N1组小鼠肺组织出现充血、水肿现象，同时发生弥漫性炎症细胞浸润，伴有上皮细胞脱落、坏死，发现支气管上皮细胞变形;LC组小鼠相较 H1N1组小鼠肺组织水肿、充血现象减轻，炎症细胞浸润明显减少，肺部病变得到缓解。与对照组比较，H1N1组小鼠肺组织 JAK1、STAT3 蛋白表达水平明显升高，差异有统计学意义（P<0.05）。H1N1组小鼠血清IgG水平明显高于对照组，LC组小鼠血清IgG水平明显高于对照组、H1N1组，差异有统计学意义（P<0.05）。
结论
连花清瘟颗粒可以抑制甲型 H1N1 流感病毒性肺炎小鼠体内JAK/STAT信号通路，增强小鼠免疫力，减少小鼠肺组织损伤。
关键词
激酶/信号转导及转录激活因子信号通路; 连花清瘟颗粒; 甲型H1N1流感病毒; 动物实验
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