人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞系原代培养取材注意事项及要求 这些你都清楚吗？
发布时间：
2021-12-09
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类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是临床常见的慢性炎性自身免疫性疾病,以多关节炎症、滑膜增生和骨侵蚀为基本特征。吉妮欧提供 人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞系的原代培养技术及销售代购相关服务，也可帮忙代做细胞建系。如有需要的同学请来电或在线预约！
滑膜炎症伴大量血管翳形成是导致RA骨侵蚀、关节破坏的主要原因。疾病过程中,异常的血管新生是滑膜增生和血管翳形成的病理基础。调节血管新生的因子有许多种,其中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是最重要的因子之一;其次,基质金属蛋白酶-9(MMP-9)也对血管翳的增生有重要作用。
原代细胞的取材
人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，是进行细胞培养的第一步，若取材不当，将会直接影响细胞的体外培养，现将取材的基本要求和注意事项叙述如下：
取材的基本要求
（1）取材要注意新鲜和保鲜 新鲜组织易于培养成功，取材时应尽量在4~6h内能制作成细胞，尽快入箱培养，若不能即时培养，应将组织浸泡于培养液内，于4℃存放。若组织块较大，应在清除表面血块、坏死组织、脂肪和结缔组织后，切碎于培养液内4℃存放，但时间不能超过24h。对于已切碎的组织或血液、淋巴组织应加入含10%二甲基亚砜的培养基，按细胞冻存方式于液氮中冷冻保存。
（2）取材应严格无菌 所取标本材料应在无菌条件下进行，为了确保无菌，对所取材料若疑有污染的可能，应将所取组织在含高浓度抗菌素（400单位/mL）甚至加入适量的两性霉素B或10%达克宁液的培养液内于4℃下存放2小时以上，再用PBS洗2~3次，以确保所取材料无菌。要用无菌包装的器皿或事先消毒好的带少许培养液（内含400单位/mL抗菌素）的小瓶等便于携带的物品来取材，所取材料应避免接触有毒有害的化学物质，如碘、汞等。
（3）取材和原代细胞制作时，要用锋利的器械，如手术刀或剃须刀片切碎组织，尽可能减少对细胞的机械损伤。
（4）要仔细去除所取材料上的血液（血块）、脂肪、坏死组织及结缔组织，切碎组织时应避免组织干燥，可在含少量培养液的器皿中进行。
（5）取材应注意组织类型、分化程度、年龄等，一般来讲，胚胎组织较成熟个体组织容易培养，分化低的较分化高的组织容易生长，肿瘤组织较正常组织容易培养。取材时应尽量选用易培养的组织进行培养。
（6）原代细胞取材时要同时留好组织学标本和电镜标本。对组织的来源、部位、包括供体的一般情况要做详细的记录，以备以后查询
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