双酚A BPA诱发大鼠卵巢储备功能下降DOR动物模型的最佳制备方案并明确其中医证候属性
发布时间：
2022-08-17
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摘要
卵巢储备功能下降（DOR）是指卵巢内存留的可募集的卵泡数量和（或）卵母细胞质量下降，临床表现以月经异常、不孕症和围绝经期类不适为主。该病发病率逐年升高，且有低龄化发展趋势21，若不及早进行有效干预，可在1~5年发展为卵巢早衰31，是妇科领域研究的热点和难点之一。
双酚A（BPA）是当前环境普遍存在的环境污染物L，现有研究证实其对卵巢功能有不利影响【。2018年5月—2021年12月，本团队拟在此基础上构建一种新的DOR病证结合动物模型并分析其证候属性，以期为进一步挖掘中医药对抗环境污染、保护女性生育力提供依据。
目的
探讨双酚A（BPA）诱发大鼠卵巢储备功能下降（DOR）动物模型的最佳制备方案，并明确其中医证候属性。
方法
选择动情周期规律的3、6月龄雌性清洁SD大鼠各18只，不同月龄分别按随机数字表法分为低、中、高剂量组。低、中、高剂量组每日分别给予50、100、200my/kg BPA混悬液灌胃，均每日灌胃1次，至大鼠动情周期紊乱。观察大鼠一般情况；阴道涂片观察大鼠动情周期；取大鼠腹主动脉血，分离血清，用ELISA法检测血清促卵泡生成素（FSH）、促黄体生成素（LH）、雌二醇（E，）、抗苗勒氏管激素（AMH）、抑制素-B（INHB）；取双侧卵巢组织形态，测算各级卵泡比例、卵巢指数。选择观察指标变化最明显组所用的模型制备方法为最佳方法。将造模成功的18只大鼠按照随机数字表法分为对照组、右归丸组、养精种玉汤组，每组6只，分别给予蒸馏水、治疗肾阳虚的右归丸、治疗肾阴虚的养精种玉汤按ImL/100g体质量灌胃，连续2周。对比各组动情周期变化，肾阳虚症状，卵巢组织形态、卵巢指数、各级卵泡比例，血清激素、INHB、AMH水平。
结果
3、6月龄各BPA干预组大鼠活动减少，喜蜷卧扎堆。3月龄中剂量BPA组动情周期紊乱时间较其他组短；AMH水平最低，原始卵泡最少，闭锁卵泡最多，因此3月龄中剂量BPA组的模型制备方法最佳。模型组大鼠实验期间持续处于动情周期紊乱状态，养精种玉汤组大鼠有1 只恢复规律动情周期，右归丸组有5只大鼠恢复规律动情周期。右归丸组大鼠规律动情周期恢复数量（5只）高于对照组（无）、养精种玉汤组（1只），肾阳虚症状明显改善。模型组大鼠卵巢苍白，体积变小，质硬右归丸组大鼠卵巢颜色红润，体积变大，组织弹性好，表面有多个生长卵泡养精种玉汤组大鼠卵巢表面生长卵泡少，组织弹性差。与对照组、养精种玉汤组比较，右归丸组大鼠原始卵泡比例高、闭锁卵泡比例低，AMH水平高（P均<05）。结论 3 月龄SD大鼠每日以100mg/kg的BPA灌胃可成功制备DOR动物模型，以方测证表明该动物模型的中医证候属性为肾阳虚型。
关键词
卵巢储备功能下降,双酚A,动物模型,以方测证,大鼠模型,模型大鼠,小鼠模型,模型小鼠
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