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构建293T-KO-BRAF/293T-KO-CDKN2A基因敲除株
构建293T-KO-BRAF/293T-KO-CDKN2A基因敲除株, 1、设计sgRNA-Cas9; 2、构建sgRNA-Cas9质粒; 3、用lipofectmine2000转染试剂将sgRNA-Cas9转染进293T细胞; 4、检测荧光率,对293T细胞单克隆后进行位置标记; 5、扩培后测序验证; 293T-KO-BRAF细胞:由比对图表明,基因组发生了一段缺失突变(140924549-140924567已缺失)。 293T-KO-CDKN2A细胞:由上图红色圈所示,基因组有一个碱基的插入突变。
2023-07-21
DLD1-OE-X基因-puro 疾病相关基因稳转株构建
HCT116-shX基因-puro 疾病相关基因稳转株构建
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