HBV乙肝新小鼠模型1.1X 久显著地降低小鼠肝脏乙肝表面抗原和核心抗原水平

发布时间：

2022-02-24

来源：

专业提供(ATCC,DSMZ,RCB,JCRB细胞库源细胞、动物实验、CRO服务、SCI润色)

作者：

吉妮欧

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研究人员设计的HBV1.1X模型是首个可调节creo的HBV转基因小鼠模型，具有模拟慢性HBV感染价值，具有新生儿对HBV抗原的表达和耐受性，可按需来调节HBV表达

　　乙肝病毒只能自然感染人类和黑猩猩，由于缺乏合适的小动物实验，导致更为有效的HBV新疗法开发受限。美国德克萨斯儿童医院、休斯顿卫理公会医院等研究人员介绍，开发了新的HBV转基因小鼠模型可以模拟慢性HBV感染，永久显著地降低小鼠肝脏乙肝表面抗原和核心抗原水平。

　　乙肝新HBV小鼠模型1.1X，美国科学家设计，永久显著降低表面抗原
　　从前沿科学角度，已有科学家开发出包含一个完整的超长1.3mer构建的HBV转基因小鼠模型。但是，该模型缺乏共价闭合环状DNA（cccDNA），即乙肝病毒的外体转录模板，并且由于乙肝病毒整合在每个细胞中，导致HBV无法治愈。已有模型中，主要将HBV基因组整合到小鼠染色体，但这种模型并无法治愈HBV小鼠。
　　研究人员介绍，研究人员开发了一种新的转基因小鼠模型，允许乙肝病毒从小鼠染色体中切除，形成一个重组环状DNA分子，类似于天然的环状乙肝病毒基因组。在这些小鼠中，乙肝病毒表达实现了降低，在这个新小鼠模型中使功能性治愈成为可能。吉妮欧介绍一下，美国研究人员的制备方法与科学性：前面提到，动物模型研究困难需要解决2个问题，一个是cccDNA，一个则是HBV整合细胞。

　　研究人员制作了一个新的转基因小鼠（命名为：HBV1.1X），它使用了Cre/LoxP技术生成一个可以切除的循环HBV基因组。模型具有敲入ROSA26基因座的HBV1.1-mer盒式表达，被设计用来从出生开始稳定表达病毒蛋白，这就像目前的HBV转基因小鼠模型，在基因组切除和引入Cre重组酶之前完成。研究人员的目标是设计一个小鼠模型，HBV蛋白可以从一个整合的基因组中表达，然后，在这个整合的HBV基因组中可以被切除并形成rcccDNA。
　　切除的rcccDNA不会扩增，因为在小鼠中缺乏cccDNA的形成，伴随时间推移可以导致肝细胞有丝分裂的缓慢丢失。为了实现以上这些目标，研究人员试图模拟目前使用的HBV超长1.3 mer基因组，旨在促进所有的病毒蛋白生产。该超长区域复制了部分HBV x蛋白（HBx）的ORF，因此，在HBx蛋白中寻找可以耐受的处理位置。

　　研究人员选择了一个肽插入策略，来避免删除对HBx功能至关重要的蛋白质结构域，因为在LoxP位点额外发现的12个氨基酸，只会在蛋白质中形成一个额外的环或连接体，而不会引起干扰产生。HBx中转录反式激活所需的两个蛋白基序之间的区域，但在聚合酶编码序列结束后和增强子II区域开始前，研究人员找到了一个合适的靶点。
　　结果表明，通过病毒或转基因Cre在HBV1.1X小鼠中，可以表达诱导重组cccDNA（rcccDNA）的形成，并在小鼠中通过Cre调节乙肝表面抗原（HBsAg）和核心抗原（HBc）表达。诱导的Cre，能够显著下调HBV整体基因组的HBsAg基线水平。为了证明从HBV1.1X小鼠中清除HBV，研究人员给药表达Cre的腺病毒，通过rcccDNA切除和随后的免疫应答观察到，永久性地显著降低了小鼠肝脏中的乙肝表面抗原与乙肝核心抗原水平。

　　综上所述，美国研究人员结论：研究人员设计的HBV1.1X模型是首个可调节creo的HBV转基因小鼠模型，具有模拟慢性HBV感染价值，具有新生儿对HBV抗原的表达和耐受性，可按需来调节HBV表达。简单的讲，吉妮欧对美国科学家开发设计的这项新动物模型做一个解释：以往科学界已经开发出了HBV转基因小鼠模型，但这些模型还无法解决cccDNA或整合细胞，这项研究设计的是一个新转基因小鼠模型；
　　它能够允许HBV从小鼠染色体中切除。乙肝病毒的整合特性，阻止了以往模型治愈HBV，所以，研究人员设计了这种新转基因小鼠和HBV基因组切除方法。这种方法名为Cre/LoxP技术，它可以有效地将整合的HBVDNA转化为类似HBV cccDNA的重组环状基因组。再将腺病毒（Ad-Cre）注射到研究人员的HBV转基因小鼠中，发现可以消除HBV蛋白产生，并且诱导小鼠免疫应答。