吉妮欧提供ELISPOT分析检测服务助力疫苗研发
发布时间:
2024-12-23
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ELIspot(酶联免疫斑点检测)是一种结合细胞培养技术与酶联免疫吸附技术(ELISA)的实验方法,用于检测单个细胞分泌的细胞因子。该技术使用涂有特定抗体的膜来捕获细胞因子,通过酶联斑点显色的方式展示结果。

ELISpot 实验原理图 来源于Janetzki S, Price L, Schroeder H, Britten CM, Welters MJ, Hoos A. Guidelines for the automated evaluation of Elispot assays. Nat Protoc. 2015 Jul;10(7):1098-115. doi: 10.1038/nprot.2015.068. Epub 2015 Jun 25. PMID: 26110715.
ELIspot 实验大致流程
1. 膜准备
使用PVDF膜为底的96孔板,包被特定的单克隆抗体。
2. 细胞培养
• 向孔内添加待检测的细胞和抗原刺激物进行培养。
• 在刺激下,细胞会分泌相应的细胞因子,这些因子被膜上的抗体所捕获。
3. 洗涤与检测
• 洗去细胞后,被捕获的细胞因子与生物素标记的第二抗体结合。
• 使用酶标记的亲和素与生物素结合,进行化学酶联显色,形成圆形斑点。
4. 数据分析
统计膜上斑点的数量,并将其除以初始细胞的总数,以计算阳性细胞的百分比。

ELISpot实验结果图与对应统计表格
ELIspot 技术特点
高灵敏度:在一百万个阴性细胞中,可以检测到一个阳性细胞,灵敏度比传统ELISA高2-3个数量级。
单细胞水平:检测活细胞分泌的细胞因子,而非细胞群体的平均分泌,有效评估活细胞功能。
操作简便与经济:无需复杂的细胞体外扩增过程,无同位素使用,也不需要大型专用设备,能够处理大量样品,提高检测效率。
ELIspot技术广泛应用于:
• 感染性和肿瘤疫苗的临床药效学评估
• 免疫原性检测:影响CAR-T细胞扩增和存续的重要因素。
• 药物筛选:评估基因治疗产品安全性和有效性的重要指标。
通过ELIspot技术,研究人员可以获得更准确、有效的细胞因子分泌信息,为疫苗开发和免疫疗法研究提供了重要工具。
案 例 展 示
乙肝mRNA疫苗动物模型-Elispot-T细胞检测

乙肝mRNA疫苗动物模型-Elispot-HBsAb

吉妮欧生物拥有丰富的细胞资源和动物模型,可提供多种体外细胞检测服务,我们在这领域积累了丰富经验和大量的实验数据。
为助力疫苗研发,吉妮欧生物可提供ELISpot分析检测服务,根据客户的不同需求,设计合适的方案,提供有效的方法学验证,出具个性化的分析结果报告,不仅可以为客户提供一站式ELISpot分析检测服务,也可为有需求的客户提供读板服务。

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